A polimeráz láncreakció - a PCR

PCR - 1

A PCR-gép betöltése

Két primért készítenek, amelyek közreveszik a DNS-nek azon specifikus részeit, amelyek másolásra kerülnek. Ezek rendszerint 15-30 bázis hosszúak és a DNS-lánc ellentétes végeinek kiegészítői (komplementerjei).

Egy teljes (kettős-láncú) DNS-t kivonnak a tanulmányozás alatt álló sejtből.
A DNS-t összekeverik a priméreket fölös mennyiségben tartalmazó oldattal
Egyenlő mennyiségű, nagyon tiszta DNS "építőelemeket" (dCTP, dATP, dGTP és dTTP - egy típust mind a négy bázis számára) adnak az oldathoz.
Végül, hőálló Taq DNS polimerázt (a termálvizekben élő Thermus aquaticus baktériumból készített DNS-szintetizáló enzimet) adnak a reakciókeverékhez

Melegítés és hűtés

A kettős fonalú DNS-t, 95-98 ^oC-ra való melegítés révén két egyfonalas szálra (mintára) választják szét.
A keveréket 37 ^oC-ra hűtik le. A primerek a DNS komplementer szálvégeihez kapcsolódnak
72 ^oC-ra való felmelegítéssel (amely hőmérséklet a Taq DNS-polimeráz számára optimális) elősegítik új DNS-szálak enzimazikus szintézisét a meglévő minták alapján.
A keveréket újból felmelegítik, hogy az újonnan keletkezett DNS-szálakat társaiktól ismét elválasszák.
A hűtési és melegítési folyamatot megismétlik. Minden egyes ilyen ciklus során a DNS-szálak megduplázódnak. 25 ciklus után több mint egymillió DNS-másolat keletkezik.